Le Musée Civique et Diocésain d'Art Sacré de Montalcino est installé dans une partie de l'ancien couvent Sant'Agostino, du XVe siècle, qui comprend l'un des deux cloîtres et la salle capitulaire. 

La collection, vaste et organique, permet aux visiteurs de découvrir la production artistique locale du Moyen Âge au XXe siècle historique, avec un accent particulier sur la tradition picturale siennoise, représentée par des maîtres tels que Bartolo di Fredi, Simone Martini, Ambrogio Lorenzetti, Giovanni di Paolo et Sano di Pietro, et enfin par un peintre et photographe local, Arturo Luciani.

Parmi les œuvres exposées figurent de nombreuses sculptures en bois peint, liées au Moyen Âge à une série de besoins liturgiques et réalisées par les plus grands artistes de l'époque, de Jacopo della Quercia à Francesco di Valdambrino. En plus d'autres chefs-d'œuvre, tels que le Crucifix de Giambologna, on y trouve également d'importantes expositions de céramiques, de textiles, d'orfèvrerie et de miniatures médiévales.